胎牛血清的正確保存方式

2023/02/23 11:53

胎牛血清自上市以來(lái)一直存在爭(zhēng)議。從制造商、價(jià)格、鑒定到產(chǎn)品質(zhì)量,如何正確保存產(chǎn)品都是一些大問(wèn)題。將帶領(lǐng)您學(xué)習(xí)如何正確使用和保存血清。

標(biāo)準(zhǔn)血清的鑒別方法:

血清凝固沉淀的淡黃色透明液體,如從血管中提取血液,放入試管中,無(wú)抗凝劑,血液迅速凝固,形成凍結(jié)。凝血塊收縮,周圍沉淀的淡黃色透明液體為血清,凝血后也可通過(guò)離心獲得。在凝血過(guò)程中,纖維蛋白原轉(zhuǎn)化為維蛋白塊,因此血清中沒(méi)有纖維蛋白原,這與血漿不同。在凝血反應(yīng)中,血小板釋放出許多物質(zhì),凝血因子也發(fā)生了變化。這些成分留在血清中,并繼續(xù)改變,如凝血酶原轉(zhuǎn)化為凝血酶,隨著血清儲(chǔ)存時(shí)間的逐漸減少甚至消失。這些也是與血漿的區(qū)別。但大量不參與凝血反應(yīng)的物質(zhì)與血漿基本相同。為了避免抗凝劑的干擾,血液中許多化學(xué)成分的分析都以血清為樣本。

牛血清作用:

胎牛血清是細(xì)胞培養(yǎng)中大量zui的天然培養(yǎng)基,富含細(xì)胞生長(zhǎng)所需的營(yíng)養(yǎng)物質(zhì),常用于動(dòng)物細(xì)胞的體外培養(yǎng),具有重要的功能。

血清保存要點(diǎn):

1.需要長(zhǎng)期保存的血清務(wù)必儲(chǔ)存在-20℃-70℃的低溫冰箱中。4℃冰箱的保存時(shí)間不得超過(guò)1個(gè)月。因?yàn)檠褰Y(jié)冰時(shí)體積會(huì)增加10%左右,所以在冷凍在低溫冰箱之前,血清務(wù)必保留一定的體積空間,否則容易污染或玻璃瓶?jī)隽选?/span>

2.熱滅活是指56℃,30分鐘加熱完全解凍的血清,加熱過(guò)程務(wù)必均勻搖晃,熱處理的目的是滅活血清中的補(bǔ)充成分。除非必要,否則一般不建議進(jìn)行這種熱處理,因?yàn)闊崽幚頃?huì)導(dǎo)致血清沉淀顯著增加,但也會(huì)影響血清的質(zhì)量。補(bǔ)充劑的參與反應(yīng)包括:細(xì)胞毒性、平滑肌細(xì)胞收縮、肥大細(xì)胞和血小板釋放組胺,增強(qiáng)吞噬作用,促進(jìn)淋巴細(xì)胞和巨噬細(xì)胞的化學(xué)趨化和活化。

3.瓶裝血清解凍應(yīng)逐步解凍:-20℃至-70℃低溫冰箱中的血清在4℃冰箱中溶解1天。然后移入室溫,待完全溶解后重新包裝。在溶解過(guò)程中,需要輕輕搖晃均勻(小心不要引起氣泡),使溫度和成分均勻,減少沉淀的發(fā)生。不要將血清從-20℃直接解凍到37℃,因?yàn)闇囟茸兓?,容易?dǎo)致蛋白質(zhì)凝結(jié)和沉淀。

4.一般廠家提供的血清無(wú)菌,無(wú)需過(guò)濾消毒。如果發(fā)現(xiàn)血清有懸浮物,可以將血清加入培養(yǎng)液一起過(guò)濾,不要直接過(guò)濾血清。

5.血清中的沉淀物和絮狀物:主要是血清中的脂蛋白變性和解凍后血清中的纖維蛋白引起的,不會(huì)影響血清本身的質(zhì)量。離心3000rpm可以在5分鐘內(nèi)去除,也可以不用處理。顯微鏡下的“小黑點(diǎn)”:經(jīng)過(guò)熱處理的血清,沉淀物的形成將顯著增加。一些沉淀物在顯微鏡下被觀察為“小黑點(diǎn)”,通常被誤認(rèn)為是血清污染。一般來(lái)說(shuō),這個(gè)小黑點(diǎn)不會(huì)影響細(xì)胞的生長(zhǎng),但如果懷疑血清的質(zhì)量,應(yīng)立即停止使用,以更換另一批血清。

6.不要把血清放在37℃太久,否則血清會(huì)變得渾濁,血清中的有效成分會(huì)破裂,影響血清質(zhì)量的保存/運(yùn)輸:-5°C~-20°C。

動(dòng)物血清